SDS-PAGE凝胶电(🍑)泳技术
SDS-PAGE凝胶电泳,即聚丙烯酰胺凝(🥐)胶电泳,是生物化学和(hé )分子生物学(🔼)实(shí )验中常用的蛋白质(🈚)(zhì )分离和(hé )鉴定技术,这项(xiàng )技术的基本原(yuán )理是利用蛋白质在电场中的迁移率与其分(⬅)子量成(🌝)(chéng )反比的(de )关系,通过添加阴(yīn )离(lí(🚪) )子洗涤剂SDS(十二烷基硫酸钠)使蛋白(bái )质带上负电荷(hé ),从而消除(💦)了蛋白质原有的电荷差(chà )异,使得蛋白(bái )质的迁移仅受其大(🌳)小的(de )影响(xiǎng )。
操作步骤(zhòu )方面,首先需要制备适当(dāng )浓度和pH值的聚丙烯酰(xiān )胺凝胶,然后将含有(yǒu )SDS和(hé )还原剂的蛋白质样品加入凝胶孔(kǒng )中,通电后,蛋白质开始(shǐ )根据大小分离,小分子蛋白质移动得更快(kuài ),而大分子(📞)蛋白质则较慢,通(tōng )过(🔼)染色或西(xī )方印迹(jì )等方(fāng )法可(kě )以检测和分(🕳)析蛋白(bái )质。
应用范围广泛,SDS-PAGE不仅用于蛋白质分子量的(de )测定,还广(guǎng )泛应用于蛋白质(zhì )纯化(huà )程度的分析、蛋白质变性和复(fù )性研究以(🔃)及蛋白质-蛋白质相互作用的研(yán )究,它也是研(yán )究蛋白质翻译后修饰的重要工具(jù(🚋) )。
尽管SDS-PAGE是一种强(qiáng )大的分析工具,但它也有(👔)局限性,对于极端大小的蛋白质,分辨率可能会降低;某(🃏)些(👮)蛋(dàn )白(bá(🏨)i )质可能因(yīn )为结构的特殊性而在凝胶中的迁移不符(🤰)合预期,在进行SDS-PAGE分析(💜)时,通常需要结合其他生化和分子生物学技术以获得更准确的结果。
视频本站于2024-09-20 11:09:30收藏于/影片特辑。观看内地vip票房,反派角色合作好看特效故事中心展开制作。特别提醒如果您对影片有自己的看法请留言弹幕评论。